酶標(biāo)儀與分光光度計(jì)有什么區(qū)別?
作者:admin 時(shí)間:2021-04-02 01:35:51 點(diǎn)擊次數(shù):5680
酶標(biāo)儀和分光光度計(jì)是常用的實(shí)驗(yàn)室分析測(cè)量工具。它們的判定原則是相同的。他們都使用朗伯-比爾定律來(lái)測(cè)量樣品的吸光度。那酶標(biāo)儀與分光光度計(jì)有什么區(qū)別?下面萊恩德就為你解釋一下它們之間的區(qū)別!
一、酶標(biāo)儀與分光光度計(jì)的三大區(qū)別
酶標(biāo)儀是酶聯(lián)免疫分析儀。是酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定儀器,也稱(chēng)為微孔板檢測(cè)儀??珊?jiǎn)單分為半自動(dòng)和自動(dòng)兩大類(lèi),但其工作原理基本相同,其核心是一臺(tái)色度計(jì),即采用比色法進(jìn)行分析。測(cè)試溶液的*終體積一般要求小于250μL,這是一般光電比色計(jì)無(wú)法完成的。因此,光電比色計(jì)在酶板儀器中有特殊的要求。
分光光度計(jì)又稱(chēng)光譜儀,是將復(fù)雜的光組成成光譜線(xiàn)的科學(xué)儀器。測(cè)量范圍一般包括波長(zhǎng)為380~780 nm的可見(jiàn)光區(qū)域和波長(zhǎng)為200 ~ 380 nm的紫外光區(qū)域。不同的光源有各自獨(dú)特的發(fā)射光譜,所以不同的光源可以作為儀器的光源。
同樣,實(shí)驗(yàn)室測(cè)定吸光度的儀器、酶板儀和分光光度計(jì)也存在一定的差異,具體體現(xiàn)在以下三個(gè)方面:
(1)裝有待測(cè)溶液的容器:
分光光度計(jì)采用比色皿,酶標(biāo)儀采用塑料微孔板(酶標(biāo)板)。比色盤(pán)只能起到保持溶液的作用。每個(gè)比色皿一次只能盛一種溶液。該板通常由透明聚乙烯材料制成,對(duì)抗原和抗體有很強(qiáng)的吸附作用。因此,它被用作固相載體。平板通常有48孔或96孔,每個(gè)微孔可以容納不同的溶液。
(2)光路方向:
分光光度計(jì)為水平光路,酶平板儀為垂直光路。因?yàn)樗芰衔⒖装搴忻傅臉悠范嘈卸嗫装?光只能通過(guò)垂直,所以酶的梁板儀器垂直通過(guò)解決方案進(jìn)行測(cè)試和微孔板、梁不僅可以從上到下,通過(guò)比色也從下到上的解決方案。垂直光的特點(diǎn)是樣品的吸光度影響較小的濃度或稀釋的液體,和缺陷是它極大地影響液位的水平的樣本進(jìn)行測(cè)試,HRP-plate的透光率,在平滑的洞底。
(3)光路長(zhǎng)度:
因?yàn)楣饷芏?OD值)與吸收系數(shù)、待測(cè)組分的濃度和光路的長(zhǎng)度成正比。
分光光度計(jì)所使用的比色杯的寬度通常為1cm,所以光路的長(zhǎng)度固定在1cm。因此,不同儀器、不同批次測(cè)量的數(shù)據(jù)具有同等可比性。
而酶標(biāo)儀使用的是垂直光路,所以光路的長(zhǎng)度應(yīng)該是液體表面的高度。所以測(cè)量值受試樣體積的影響。