酶標(biāo)儀(ELISA儀)是一種用于測(cè)定生物樣品中特定分子(如蛋白質(zhì)、抗體、抗原等)含量的分析儀器。它基于酶標(biāo)記物與待測(cè)物相互作用的原理,并通過(guò)測(cè)量酶標(biāo)記物的信號(hào)來(lái)定量分析目標(biāo)物的濃度。以下是酶標(biāo)儀的常用功能原理與應(yīng)用介紹:

1. 酶標(biāo)記物:酶標(biāo)記物是一種能與待測(cè)物特異性結(jié)合的分子,通常是酶,如辣根過(guò)氧化物酶(HRP)或堿性磷酸酶(AP)。酶標(biāo)記物可以通過(guò)共價(jià)結(jié)合或非共價(jià)結(jié)合到待測(cè)物上。
2. 酶標(biāo)記物與待測(cè)物的結(jié)合:在ELISA實(shí)驗(yàn)中,待測(cè)物(如抗原或抗體)被固定在試板上。樣品中的目標(biāo)物與待測(cè)物發(fā)生特異性結(jié)合。然后,酶標(biāo)記物(如HRP)結(jié)合的目標(biāo)物形成復(fù)合物。
3. 底物反應(yīng):待測(cè)物與酶標(biāo)記物結(jié)合的復(fù)合物形成后,加入適當(dāng)?shù)牡孜?,如TMB(3,3',5,5'-四甲基聯(lián)苯胺)。底物與酶標(biāo)記物反應(yīng)產(chǎn)生可測(cè)量的顏色變化。
4. 信號(hào)檢測(cè)與分析:酶標(biāo)儀通過(guò)測(cè)量底物反應(yīng)后的產(chǎn)物的光學(xué)密度或熒光強(qiáng)度來(lái)定量分析目標(biāo)物的濃度。光學(xué)密度或熒光強(qiáng)度與目標(biāo)物的濃度呈正相關(guān)關(guān)系。
酶標(biāo)儀在醫(yī)學(xué)、生物學(xué)、食品安全等領(lǐng)域中有廣泛應(yīng)用,常見(jiàn)的應(yīng)用包括:
1. 臨床診斷:酶標(biāo)儀可用于檢測(cè)血清或尿液中的生物標(biāo)志物,如病毒、細(xì)菌、抗體等,用于早期疾病診斷和疾病監(jiān)測(cè)。
2. 藥物研發(fā):酶標(biāo)儀可用于評(píng)估藥物的有效性和毒性,通過(guò)測(cè)定藥物對(duì)特定蛋白質(zhì)或抗體的影響來(lái)評(píng)估藥物的藥理學(xué)特性。
3. 植物學(xué)研究:酶標(biāo)儀可用于檢測(cè)植物中的激素、養(yǎng)分、抗氧化物質(zhì)等,用于研究植物生長(zhǎng)、代謝和響應(yīng)環(huán)境脅迫的機(jī)制。
4. 食品安全檢測(cè):酶標(biāo)儀可用于檢測(cè)食品中的致病微生物、過(guò)敏原、殘留農(nóng)藥等有害物質(zhì),用于食品安全監(jiān)測(cè)和質(zhì)量控制。
總之,酶標(biāo)儀是一種常用的分析儀器,通過(guò)酶標(biāo)記物與待測(cè)物的特異性結(jié)合和底物反應(yīng)來(lái)定量分析目標(biāo)物的濃度。它在醫(yī)學(xué)、生物學(xué)、食品安全等領(lǐng)域中具有廣泛的應(yīng)用價(jià)值。